轉染技術新寵-陽離子聚合物基因轉染技術

適用宿主廣泛，操作簡便，細胞毒性小，轉染率高。其中聚乙烯亞胺（PEI）的轉染性能最好。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔兩個碳原子，就是第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何PH下都能充當有效的“質子海綿”體。這種聚陽離子能將各種報告基因轉入各種種屬細胞，其效果好于脂質聚酰胺，而且細胞毒性低。大量實驗證明，PEI是非常有希望的基因治療載體。目前在設計更復雜的基因載體時，PEI經常做為核心組成成分。

線性聚乙烯亞胺（LinePEI）轉染復合物的細胞毒性低，有利于細胞定位，而且轉染率極高。

Polyscience公司的兩款明星產品線性聚乙烯亞胺（23966-1和24765-1）近年來越來越多的受到研究者們的青睞。其產品被運用到大量的轉染實驗中，也出現在大量的文獻中。

Polyscience公司成立于1961年，總部位于賓夕法尼亞州沃靈頓，是一家生產研發化學產品的公司。該公司的產品種類已經累計超過3000種，其產品的特點是體積小，附加值高。

公司產品主要包含：

1、 單體和聚合物

2、 微球和粒子（有機、無機、可生物降解、磁珠、熒光素、染料、特異性抗體和蛋白包被顆粒，直徑從40nm到10mm）用于核酸提取、蛋白分離和純化等。

3、 高性能粘合劑、涂料和密封劑

23966-1

Polyethylenimine,Linear,MW25000

TransfectionGrade(PEI25K)

24765-1（更高效的PEI聚乙烯亞胺聚合物轉染試劑）

PEIMAX-TransfectionGradeLinearPolyethylenimineHydrochloride

(MW40000)

PolyethylenimineHClMAX,Linear,Mw40000（PEI40000）是熱賣產品線性化聚乙烯亞胺PEI25000的升級產品，不同之處在于1）完全水解（去乙酰化）；2）PEI25000的鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3）含更長連續性乙烯亞胺（ethyleneimine）片段，其質子化氮水平比PEI25000提高11%以上。本品經堿中和后，可轉化為線性化自由胺（PEI),此時分子量正相當于25000。

ThomasM,etal（2005）研究數據表明,去乙酰化的PEI40000（PolyethylenimineMAX40000）體外質粒DNA轉染效率提高21倍，小鼠體內靶向效率達到10,000倍，隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。

使用方法（僅供參考）

1. Pour~450mLofMilli-QH2Ointoa500-mLglassbeaker.

2. Add500mgofPEItothebeakerwithstirring.

3. AddconcentratedHCldrop-wisetothesolutiontopH<2.0.

4. StiruntilthePEIisdissolved(~2-3h).MaintainthepH<2.0throughout.

Approximately800μLof12MHClwillberequiredforfullPEIdissolution.Theremaystillbesomesmallfiberparticlesthatwillnotdissolve.

5. AddconcentratedNaOHdrop-wisetothesolutiontopH7.0.

Approximately500μLof10MNaOHwillberequiredtoneutralizethePEIsolution.

6. Pourthesolutionintoa500-mLglasscylinder.Adjustthefinalvolumeto500mLwithMilli-QH2O.

7. Filter-sterilizethesolutionthrougha0.22-μmmembrane.

8. Storealiquotsofthedesiredvolumeat-20°C.

蘇州螞蟻淘生物科技有限公司

www.ebiomall.com